مطالعه ترمودینامیکی و سینتیکی برخی فلاونوئیدها(کرایسین و گالیک اسید)با آنزیم اوره آز باقلا

اوره آز به خانواده بزرگ آمیدوهیدرولازها تعلق داردو متالو آنزیم وابسته به اتم نیکل است که اوره را با سرعتی تقریباٌ برابر1012 مرتبه هیدرولیز کرده و منجر به تولید دو مولکول آمونیاک ویک مولکول دی اکسید کربن می شود.آمونیاک با روش های مختلفی سنجش می شوداز جمله: الکترودهای یون-گزین،واکنش با فنول-هیپوکلریت ویا معرف های نسلر.جلوگیری ازفعالیت آنزیم اوره آز نقش به سزایی هم درعلم پزشکی وهم درکشاورزی داشته است، بنابراین از مهارکننده هایی برای مهارسازی فعالیت آنزیم اوره آز استفاده می شود. دراین پژوهش با انتخاب دوترکیب فلاونیدی،کرایسین و گالیک اسیدبه عنوان مهارکننده به بررسی سینتیک و ترمودینامیک مهارسازی فعالیت آنزیم اوره از پرداخته شده است.مهارسازی آنزیم اوره آز با استفاده از دو روش مطالعه شده ، روش اول از سنجش ایندوفنول استفاده شده که بوسیله ویتربرن به اثبات رسیده است و درآن پتانسیل بازدارندگی با استفاده از تکنیک اسپکتروسکوپی ماورای بنفش-مرئی در طول موج 625 نانومتر اندازه گیری می شود و روش دوم از تکنیک کالریمتری تیتراسیون همدما(itc ) استفاده شده که پارامترهای ترمودینامیکی واکنش پروتئین –لیگاند را تعیین می کند. کرایسین برروی اوره آز، اثر مهارکنندگی به صورت غیررقابتی داشته و گالیک اسید با توجه به مهارکنندگی آن و پارامترهای ترمودینامیکی حاصل شده پایدارکننده اوره آز بوده و برهمکنشی گرمازا داشته است.